Спектрофотометрия - бул зат тарабынан сиңирилген жарыктын көлөмүн эсептөө аркылуу белгилүү бир эритмедеги эриген заттын концентрациясын өлчөө үчүн колдонулуучу эксперименталдык техника. Бул ыкма абдан пайдалуу, анткени кээ бир кошулмалар ар кандай интенсивдүүлүктө ар кандай толкун узундуктарын сиңирип алышат. Эритмеден өткөн жарыкты анализдөө менен, эритмеде эриген бирикмелерди жана алардын концентрацияларын аныктай аласыз. Бул техниканын жардамы менен лабораторияда чечимдерди талдоо үчүн колдонулган курал - спектрофотометр.
Кадам
3төн 1 бөлүк: Үлгүнү даярдоо
Кадам 1. Спектрофотометрди күйгүзүңүз
Көпчүлүк спектрофотометрлер так өлчөө берерден мурун жылытылышы керек. Ошентип, машинаны күйгүзүп, анан үлгүнү өлчөөдөн мурун кеминде 15 мүнөт отуруп коюңуз.
Үлгүнү даярдоо үчүн бул убакытты колдонуңуз
Кадам 2. Кюветаны же пробирканы тазалаңыз
Мектеп лабораторияларында бир жолу колдонулуучу пробиркалар болушу мүмкүн, аларды биринчи тазалоо керек эмес. Бирок, эгерде сиз кадимки кюветаны же пробирканы колдонуп жатсаңыз, колдонордон мурун аппаратты жакшылап тазалаңыз. Бардык кюветтерди деионсуз суу менен чайкаңыз.
- Кюветтерди колдонууда этият болуңуз, анткени алар абдан кымбат.
- Кюветаны колдонуп жатканда, жарык өтүүчү тарапка тийбеңиз (көбүнчө идиштин ачык жагы).
3 -кадам. Кюветке жетиштүү үлгү куюңуз
Кюветтин бир бөлүгүнүн максималдуу көлөмү 1 мл, пробирканын эң чоң көлөмү 5 мл. Сиздин өлчөөлөрүңүз спектрофотометрдин жарыгы контейнердин бош бөлүгү эмес, үлгү аркылуу өтө алгыдай так болушу керек.
Эгерде сиз үлгүлөрдү киргизүү үчүн пипетканы колдонуп жатсаңыз, анда ар бир үлгү үчүн жаңы учту колдонуңуз. Ошентип, кайчылаш булгануудан сактанса болот
Кадам 4. Контролдук чечимди даярдаңыз
Бланктар же бланктар деп да аталган бул эритмелерде анализденип жаткан эритмедеги эриткич гана бар. Мисалы, эгерде сизде сууда ээриген туздун үлгүсү болсо, анда сизге бош чечим - суу. Эгерде сиз колдонгон суу кызыл болсо, анда кызыл бош чечимди да колдонушуңуз керек. Бош чечимди үлгү менен бирдей көлөмдө кармоо үчүн окшош контейнерди колдонуңуз.
Кадам 5. Кюветтин сыртын аарчыңыз
Кюветаны спектрофотометрге киргизүүдөн мурун, чаңдын бөлүкчөлөрүнөн же кошулмаларынан улам өлчөөлөргө тоскоолдук кылбоо үчүн анын таза экенине ынанууңуз керек. Кюветтин сыртына жабышып калган суу тамчыларын же чаңды кетирүү үчүн түксүз кездемени колдонуңуз.
3төн 2 бөлүк: Эксперимент
Кадам 1. Үлгү талдоо үчүн жарыктын толкун узундугун аныктоо жана тууралоо
Өлчөөнүн эффективдүүлүгүн жогорулатуу үчүн жарыктын бир толкун узундугун (монохроматтык нур) колдонуңуз. Сыноо үлгүсүндө ээриген деп эсептелген химиялык мазмунга сиңе турган жарыктын түсүн тандаңыз. Толкундун узундугун сиз колдонуп жаткан спектрофотометрдин өзгөчөлүктөрүнө ылайык коюңуз.
- Мектеп лабораторияларында бул толкун узундугу адатта эксперименталдык көрсөтмөлөрдө берилет.
- Үлгү бардык көрүнгөн жарыкты чагылдыргандыктан, эксперименталдык жарыктын түсүнүн толкун узундугу, адатта, үлгүнүн түсүнөн айырмаланып турат.
- Объект белгилүү бир түстө көрүнөт, анткени ал толкундун узундугун чагылдырат жана башка бардык түстөрдү сиңирет. Чөп жашыл болуп көрүнөт, анткени андагы хлорофилл жашылды чагылдырып, башка түстөрдү сиңирет.
Кадам 2. Спектрофотометрди бош эритме менен калибрлеңиз
Бош эритмени кюветка кармагычка салып, спектрофотометрди жабыңыз. Аналогдук спектрофотометрдин экранында жарыкты аныктоо интенсивдүүлүгүнүн негизинде кыймылдай турган ийне бар. Бош чечим киргизилгенден кийин, ийне оңго жылышы керек. Бул маанини кийинчерээк керек болсо жазыңыз. Бош эритменин спектрофотометрде калуусуна уруксат бериңиз, андан кийин жөндөө баскычын колдонуп ийнени нөлгө жылдырыңыз.
- Санариптик спектрофотометрлерди да ушинтип калибрлесе болот. Бирок, бул курал санариптик экран менен жабдылган. Бош чечимдин окуу баскычын 0го коюңуз.
- Бош чечим спектрофотометрден чыгарылса дагы, калибрлөө күчүндө калат. Ошентип, бүт үлгүнү өлчөгөндө, бланктын сиңирүүсү автоматтык түрдө азаят.
Кадам 3. Бланканы алып, спектрофотометрдин калибрлөө жыйынтыгын текшериңиз
Бош эритмени спектрофотометрден алып салгандан кийин деле экранда ийне же сан 0 деп жазылышы керек. Бош эритмени кайра спектрофотометрге салып, көрсөткүчү өзгөрбөсүн текшериңиз. Эгерде спектрофотометр бош эритменин жардамы менен туура калибрленсе, экранда жыйынтык дагы 0 болушу керек.
- Эгерде экранда ийне же сан 0 окулбаса, бош чечим менен калибрлөө кадамдарын кайталаңыз.
- Эгерде көйгөй чечилбесе, жардам сураңыз же спектрофотометрди бирөөдөн текшериңиз.
Кадам 4. Үлгүнүн абсорбциясын өлчөө
Бош эритмени алып салыңыз жана үлгүнү спектрофотометрге салыңыз. Колдор турукташканга чейин же санарип дисплейдеги сандар өзгөрүүнү токтотконго чейин 10 секунд күтө туруңуз. Үлгүнүн пайыздык өткөрүмдүүлүгүн жана/же абсорбциясын жазыңыз.
- Жарык канчалык көп өтсө, нур аз сиңет. Адатта, сиз жалпысынан ондук сан катары көрсөтүлгөн үлгүнүн абсорбциялык маанисин жазышыңыз керек, мисалы 0,43.
- Ар бир үлгүдөгү өлчөөнү жок дегенде үч жолу кайталап, андан кийин орточо эсепке алыңыз. Ошентип, сиз алган жыйынтыктар так болот.
Кадам 5. Жарыкты ар кандай толкун узундугу менен экспериментти кайталаңыз
Сиздин үлгүңүздө жарыктын толкун узундугуна жараша ар кандай absorbances бар бир нече кошулмалар болушу мүмкүн. Белгисиздикти азайтуу үчүн, жарык спектринде 25 нм толкун узундугу менен үлгү өлчөөлөрдү кайталаңыз. Ошентип, сиз үлгүдөгү башка ээриген химикаттарды аныктай аласыз.
3 -жылдын 3 -бөлүгү: Абсорбция маалыматтарын талдоо
Кадам 1. Үлгүнүн өткөрүмдүүлүгүн жана абсорбциясын эсептөө
Өткөрүүчүлүк - бул канча үлгү аркылуу жарык өтүп, спектрофотометрге жетет. Ошол эле учурда, абсорбция - бул үлгүдөгү ээриген химикаттардын бири канча жарыкты сиңирет. Өткөрүүчүлүк жана жутуу түрүндө чыгаруучу көптөгөн заманбап спектрофотометрлер бар. Бирок, эгерде сиз жарыктын интенсивдүүлүгүнүн маанисин алсаңыз, анда бул эки маанини өзүңүз эсептей аласыз.
- Өткөрүүчүлүк (T) үлгү эритмеси аркылуу өткөн жарыктын интенсивдүүлүгүн бош эритмеден өткөн жарыктын санына бөлүү аркылуу аныкталышы мүмкүн. Бул маани адатта ондук сан же пайыз катары көрсөтүлөт. T = I/I0, бул жерде мен үлгү интенсивдүүлүгү жана мен0 бош интенсивдүүлүк болуп саналат.
- Абсорбция (A) терс база катары көрсөтүлөт 10 логарифм (экспонент) өткөрүмдүүлүк: A = -log10T. Ошентип, эгерде T = 0, 1, A = 1 (0, 1 -1дин кубаттуулугу боюнча 10). Бул жарыктын 10% өтөт, ал эми 90% сиңет дегенди билдирет. Ошол эле учурда, эгерде T = 0.01, A = 2 (0.01 -10дун кубаттуулугуна 10). Бул жарыктын 0,1%болгонун билдирет.
Кадам 2. Толкун узундугуна каршы absorbance баллынын графигин түзүңүз
Абсорбция маанисин y огу жана толкун узундугу x огу катары билдириңиз. Ар бир толкун узундугундагы бардык абсорбция жыйынтыктарынын чекиттеринен сиз үлгүнүн сиңирүү спектрин аласыз жана кошулманын мазмунун жана үлгүдөгү анын катышын аныктайсыз.
Абсорбция спектрлери адатта белгилүү толкун узундуктарында чокуларга ээ. Бул толкун узундугу конкреттүү кошулмаларды аныктоого мүмкүндүк берет
3 -кадам. Абсорбция спектрин белгилүү кошулманын графиги менен салыштырыңыз
Ар бир кошулма уникалдуу сиңирүү спектрине ээ жана ар бир өлчөөдө толкун узундугу дайыма бирдей. Белгилүү бир кошулманын графиги менен алынган графикти салыштыруу менен, сиз эритменин үлгүсүндөгү мазмунду аныктай аласыз.
